倒置荧光显微镜的概念、基本原理、构成有哪些？
来源： 作者： 发布时间：2023-02-20 16:22 浏览量：283
倒置荧光显微镜是近代发展起来的新式荧光显微镜，特点是激发光从物镜向下落射到标本表面，即用同一物镜作为照明聚光器和收集荧光的物镜。光路中需加上一个双色束分离器，它与光铀呈45。角，激发光被反射到物镜中，并聚集在样品上，样品所产生的荧光以及由物镜透镜表面、盖玻片表面反射的激发光同时进入物镜，反回到双色束分离器，使激发光和荧光分开，残余激发光再被阻断滤片吸收。如换用不同的激发滤片/双色束分离器/阻断滤片的组合插块，可满足不同荧光反应产物的需要。此种荧光显微镜的优点是视野照明均匀，成像清晰，放大倍数愈大荧光愈强。倒置荧光显微镜由荧光附件与倒置显微镜有机结合构成的，主要用于细胞等活体组织的荧光、相差观察。 倒置显微镜（Inverted microscope）是为了适应生物学、医学等领域中的组织培养、细胞离体培养、浮游生物、环境保护、食品检验等显微观察。由于这些活体被检物体均放置在培养皿（或培养瓶）中，这样就要求倒置显微镜的物镜和聚光镜的工作距离很长，能直接对培养皿中的被检物体进行显微观察和研究。因此，物镜、聚光镜和光源的位置都颠倒过来，故称为"倒置显微镜"。倒置显微镜多用于无色透明的活体观察，在倒置显微镜的基础上添加一套荧光附件：激光激发块，荧光光源，荧光照明器，激发块切换装置，即可进行倒置荧光观察。进口四大品牌显微镜都有相应的倒置荧光显微镜，如奥林巴斯的IX71倒置荧光显微镜，CKX41倒置荧光显微镜。国产品牌显微镜厂家近年随着相差技术与荧光成像技术的不断提升，也推出多款倒置荧光显微镜，留辉科技DSY5000X就是一款，其荧光亮度高，且成像清晰，已经达到国外同类中档显微镜的水准。
倒置荧光显微镜的基本原理： 高信噪比(S/N)，能够捕获极弱荧光
世界领先的光学品质——对现代生命科学研究至关重要
荧光观察的理想情况是采用最低量的激发光照射捕获高对比度的图像，由此将细胞受损及荧光衰减的机会降至最小。奥林巴斯公司对UIS2系统的物镜进行精密的设计，使用微弱的激发光即可捕获明亮的荧光图像。光透过率进步的同时也提高了UIS2光学系统的信噪比。
干涉镀膜荧光激发块的性能改进 荧光激发块的干涉膜采用了新型镀膜技术，激发带宽(BP)以及荧光带宽(BA)比传统谱线缩短了6nm，使信噪比更进一步得到提高。奥林巴斯的荧光激发块采用硬镀膜技术，大大延长了激发块的使用寿命，提高了在潮湿环境中的使用性能。
荧光激发块的原理
荧光蛋白专用高质量荧光激发块
BX2系列HQ型荧光激发块最适宜的波长是ECFP/EFP/EYFP/DsRed。高锐化镀膜以及高透过率(90%-95%)可有效地透过荧光蛋白所发射的荧光。这样，即使采用微弱的激发光仍可观察到明亮的图像，同时，防止荧光衰减，并将细胞受损的可能减至最小。
减少杂散光的功能
当在分光镜对激发光进行反射时，杂散光的微量透射就可造成噪声上升。奥林巴斯公司的荧光激发块经由其独特的光吸收涂层可吸收99%以上的杂散光，减少信号干扰，获得高质量图像。
荧光成像用高数值孔径物镜
BX2系列具有新研制的PLAPON60XO物镜的特点，提供了当今普通观察方法用物镜最高的数值孔径(N. A.：1.42)，用于荧光成像，同时具有先进的通用特性。除了其突出的荧光信噪比之外，也可进行紫外激发，这在以前的普通显微镜是不能做到的。UPLSAPO100×O物镜在340nm处(紫外)仍然维持着高透过率。
详细介绍
XDS-FL(LED)倒置荧光显微镜由落射荧光显微系统与倒置生物显微系统组成，采用优良的无
限远光学系统，配置长工作距离平场物镜与大视野目镜。紧凑稳定的高刚性主体，充分体现了显微操作的防振要求。旋转摆入摆出式聚光系统，可对高培养皿或圆筒状烧瓶进行无沾染培养细胞观察。落射荧光显微系统采用模块化设计理念，可以安全、快揵地调整照明系统，切换荧光滤色片组件。产品可应用于细胞组织，透明液态组织的显微观察，也可用于生物制药，医学检测、疾病预防等领域内的荧光显微术观察。
全新LED荧光模块
性能特点：
- 采用大功率LED光源
- 轻松切换荧光和明场观察，可实时显示通首和亮度情况
- 多个高效荧光滤段可供选择，可用于不同领域的荧光检测
- LED即开即用，开机无须预热，使用寿命长，维护成本低
技术规格 Specification
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目镜Eyepiece |
大视野 WF10X(视场数Φ22mm) Wide field WF10X(field number:Φ22mm) |
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对中望远镜 Centering telescope |
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无限远平场消色差物镜 Infinity plan achromatic objective |
物镜Objective |
PLL 10X0.25 工作距离(Work distance)：4.3 mm，盖玻片厚度(Cover glass thickness)：1.2mm. |
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PLL 20X0.40 工作距离(Work distance)：8.0 mm，盖玻片厚度(Cover glass thickness)：1.2mm. |
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PLL 40X0.60 工作距离(Work distance)：3.5 mm，盖玻片厚度(Cover glass thickness)：1.2mm. |
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PLL 20X0.40 PHP2 工作距离(Work distance)：8.0 mm，盖玻片厚度(Cover glass thickness)：1.2mm. |
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目镜筒Eyepieces tube |
倾斜45˚,瞳距调节范围53~75mm. Inclination angle is 45˚ and interpupillary distance is 53~75mm. |
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3波段LED 落射荧光照明系统 Epi-fluorescent illumination system |
3波段LED控制器 电源 |
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荧光滤色片组 Fluorescent filters |
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组别Group |
类型Type |
激发片波长Wavelength of excitation light |
发射片波长Wavelength of emitted light |
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紫外（V） |
紫Ultraviolet light (UV) |
330nm~380nm |
420nm |
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蓝+绿（B+G） |
蓝Blue light (B) |
420nm ~490nm |
520nm |
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绿Green light (G) |
460nm~550nm |
590nm |
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调焦机构Focus system |
粗微动同轴,带锁紧和限位装置,微动格值:2μm. Coaxial coarse/fine focus, with tension adjustable and up stop, minimum division of fine focusing is 2μm. |
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转换器 Nosepiece |
五孔转换器Quintuple nosepiece |
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载物台 Stage |
固定载物台尺寸：227mmX208mm. Fixed stage overall size is 227mmX208mm |
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玻璃圆载物台板尺寸：Ф118mm. Glass rotundity stage overall size is Ф118mm |
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机械式移动尺寸，移动范围：纵向77mm，横向114mm， Mechanical moving device, moving range is 77mm (longitudinal)X114mm (transverse) |
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培养皿托板一Culture dish holder 1 |
内槽尺寸：86mm（宽）X129.5mm（长），可适配圆形培养皿Ф87.5mm Inside locating slot size: 86mm (W)X129.5mm (L), optional with a circular culture dish Ф87.5mm |
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培养皿托板二Culture dish holder 2 |
内槽尺寸：34mm（宽）X77.5mm（长），可适配圆形培养皿Ф68.5mm Inside locating slot size: 34mm (W)X77.5mm (L), optional with a circular culture dish Ф68.5mm |
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培养皿托板三Culture dish holder 3 |
内槽尺寸Inside locating slot size:：57mm（宽）X82mm（长）57mm (W)X82mm (L) |
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透射照明系统 Transmitted illumination system |
转盘式相衬离聚光镜，工作距离55mm，Turnplate phase contrast condenser, working distance is 55mm |
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6V30W卤素灯，亮度可调或者3WLED，6V30W halogen, brightness enable control or3W LED |
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磨砂玻璃，蓝、绿滤色片Frosted glass and blue , green filter |
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选配件 Optional Accessory |
目镜Eyepiece |
分划目镜Dividing eyepiece 10X（Φ22mm） |
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CCD接头CCD adapter |
0.5X、1X、0.5X带分划（with dividing） |
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摄像仪Camera |
USB输出：1800/2000万像素USB output: ISP1800 pixel /ISP2000 pixel HDMI输出：1080P/4K高清成像Camera HDMI output: 1080P/4K 制冷荧光摄像头：600 / 2000 万像素USB oputput:MTR3 |
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数码相机接头Digital camera adapter |
CANON(EF) NIKON( F) |
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